FAM118A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-412412

Übersicht

FAM118A kodiert ein konserviertes nukleäres Protein, das an grundlegenden Prozessen des RNA-Stoffwechsels beteiligt ist, darunter RNA-Prozessierung und die Funktion von Ribonukleoproteinkomplexen, was mit einer Rolle bei der Aufrechterhaltung der Homöostase der Genexpression vereinbar ist. Neuere funktionelle Studien deuten darauf hin, dass FAM118A zur Regulation von Programmen des Zellwachstums und des Zellüberlebens beiträgt und damit mit Signalwegen verknüpft ist, die die proliferative Kapazität und die Anpassung an Stress unterstützen. Eine veränderte Expression von FAM118A wurde in mehreren Krankheitskontexten berichtet, insbesondere in Krebserkrankungen, wo sie mit transkriptionellem und posttranskriptionellem Remodeling assoziiert sein kann. Daher ist FAM118A von Interesse, um zu untersuchen, wie RNA-regulatorische Netzwerke zelluläre Phänotypen beeinflussen, die für Transformation und Gewebehomöostase relevant sind.

Das FAM118A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des FAM118A-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des FAM118A-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von FAM118A nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die FAM118A-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von FAM118A-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der FAM118A-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf FAM118A-Exone abzielen, die für die FAM118A-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere FAM118A-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom FAM118A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom FAM118A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des FAM118A-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das FAM118A HDR-Plasmid (h) und FAM118A HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von FAM118A-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten FAM118A-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.