Plasmide Double Nickase (h) FAM103A1: sc-418204-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FAM103A1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FAM103A1 Double Nickase (h) et le plasmide FAM103A1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FAM103A1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FAM103A1 | sc-418204-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FAM103A1 | sc-418204-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FAM103A1 (family with sequence similarity 103 member A1) code une protéine humaine encore mal caractérisée, dont l’annotation fonctionnelle reste limitée, ce qui en fait une cible d’intérêt pour des approches systématiques de découverte des fonctions géniques. Les données disponibles suggèrent un rôle dans l’homéostasie cellulaire de base, avec une influence possible sur des processus tels que la gestion de l’ARN/des protéines ou des régulations liées au cycle cellulaire, via des réseaux d’interactions encore non élucidés. Comme les gènes de fonction inconnue peuvent contribuer à des phénotypes dépendants du contexte, FAM103A1 est fréquemment évalué dans des jeux de données de perturbations à l’échelle du génome pour ses effets sur la prolifération, les réponses au stress et des dépendances spécifiques de lignée cellulaire. Définir l’activité de FAM103A1 peut aider à clarifier des voies qui se dérèglent dans des états cellulaires pertinents pour la maladie, sans pour autant suggérer une utilité clinique.
FAM103A1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FAM103A1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FAM103A1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FAM103A1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FAM103A1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.