Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) EKLF/KLF1: sc-402366-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) EKLF/KLF1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide EKLF/KLF1 Double Nickase (h) et le plasmide EKLF/KLF1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KLF1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) EKLF/KLF1 | sc-402366-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) EKLF/KLF1 | sc-402366-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain KLF1 (EKLF) code un facteur de transcription de type Krüppel, restreint à la lignée érythroïde, qui se lie aux éléments CACCC afin de coordonner l’expression génique spécifique des stades au cours de l’érythropoïèse. EKLF/KLF1 régule le contrôle du locus des globines, les programmes membranaires et cytosquelettiques des érythrocytes, la biosynthèse de l’hème et la sortie du cycle cellulaire via des réseaux transcriptionnels incluant notamment BCL11A, KLF3 et des gènes de maturation érythroïde. En modulant l’accessibilité de la chromatine et la transcription au niveau des enhancers et promoteurs érythroïdes, KLF1 influence la commutation de l’hémoglobine et les trajectoires de différenciation des globules rouges. Des perturbations génétiques de KLF1 sont associées à des altérations du développement érythroïde et des profils d’expression de l’hémoglobine, ce qui souligne son intérêt pour la modélisation de phénotypes héréditaires des globules rouges et des mécanismes de régulation des globines.
EKLF/KLF1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KLF1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KLF1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KLF1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KLF1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.