Plásmido Doble Nickase (h) eIF5A: sc-401820-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)eIF5A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa eIF5A (h) y el plásmido de doble nickasa eIF5A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a EIF5A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) eIF5A | sc-401820-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) eIF5A | sc-401820-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF5A codifica el factor de inicio de la traducción eucariota 5A (eIF5A), una proteína de unión a ARN altamente conservada que se activa mediante hipusinación y favorece una elongación de la traducción eficiente, en particular a través de motivos ricos en poliprolina. eIF5A influye en el recambio del ARNm y en la dinámica del ribosoma, lo que lo vincula con la proteostasis, la progresión del ciclo celular y programas de adaptación al estrés. A través de estas funciones, EIF5A participa en vías que modulan la proliferación, la apoptosis y las salidas de señalización inflamatoria. La desregulación de la actividad de eIF5A o de la maquinaria de hipusinación se ha asociado con alteraciones del control del crecimiento y con el remodelado translacional observado en el cáncer y en otros contextos de enfermedad proliferativa o relacionada con el estrés.
eIF5A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus EIF5A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de EIF5A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de EIF5A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con EIF5A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.