Plasmide Double Nickase (h) DZIP3: sc-403972-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DZIP3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DZIP3 Double Nickase (h) et le plasmide DZIP3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DZIP3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DZIP3 Antibody (C-1): sc-514725
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DZIP3 | sc-403972-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DZIP3 | sc-403972-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DZIP3 (DAZ interacting zinc finger protein 3) est une ligase E3 de l’ubiquitine contenant des doigts de zinc, impliquée dans le renouvellement des protéines dépendant de l’ubiquitine et dans la régulation de réseaux de signalisation contrôlant la croissance cellulaire et les réponses au stress. Par son activité d’ubiquitination et ses interactions protéine–protéine, DZIP3 est associée à la protéostasie, à la régulation transcriptionnelle et à la modulation de la dynamique des voies de signalisation qui influencent l’homéostasie cellulaire. Une expression ou une activité altérée de DZIP3 a été rapportée dans des études de biologie tumorale et d’autres maladies complexes, ce qui motive des investigations mécanistiques sur la manière dont l’ubiquitination dépendante de DZIP3 façonne les phénotypes en aval. L’étude fonctionnelle de DZIP3 soutient les recherches sur l’interconnexion des voies, la signalisation dépendante du contexte et les relations génotype–phénotype dans des systèmes cellulaires humains.
DZIP3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DZIP3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DZIP3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DZIP3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DZIP3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.