Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DSCR 1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402694-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DSCR 1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DSCR 1 Double Nickase Plasmid (h) e il DSCR 1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RCAN1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DSCR 1 Antibody (G-2): sc-377507
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DSCR 1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402694-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DSCR 1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402694-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RCAN1 codifica DSCR1 (Down syndrome critical region protein 1), un inibitore endogeno e regolatore a feedback della fosfatasi calcineurina (PPP3) dipendente da calcio/calmodulina. Modulando la defosforilazione dipendente dalla calcineurina e la localizzazione nucleare dei fattori di trascrizione NFAT, DSCR1 influenza programmi di espressione genica responsivi al Ca2+ che incidono sulle risposte allo stress cellulare, sull’apoptosi e sulla differenziazione. RCAN1 è inoltre collegato alla segnalazione dello stress ossidativo e all’omeostasi mitocondriale, con effetti riportati sulla biologia neuronale e cardiovascolare. Un’attività disregolata di RCAN1/DSCR1 è stata associata ad alterazioni della segnalazione NFAT in condizioni che includono fenotipi correlati alla sindrome di Down, neurodegenerazione e disfunzione vascolare, supportandone l’impiego in studi meccanicistici di pathway.
DSCR 1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RCAN1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RCAN1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RCAN1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RCAN1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.