DR5 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423438-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DR5O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DR5 (m) e o Plasmídeo Double Nickase DR5 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Tnfrsf10b. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DR5 Anticorpo (7F4-F8-G11): sc-517559
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DR5 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423438-NIC | 20 µg | $410.00 |
O Tnfrsf10b de camundongo codifica o receptor de morte 5 (DR5), um membro da superfamília de receptores de TNF que se liga ao TRAIL e inicia a apoptose extrínseca por meio da trimerização do receptor, recrutamento de FADD e ativação da caspase-8. A sinalização de DR5 pode interagir com a amplificação mitocondrial via BID e caspase-9, ao mesmo tempo em que também envolve as vias NF-κB e MAPK, que influenciam a expressão de genes inflamatórios e respostas ao estresse. A regulação da expressão e do tráfego de DR5 molda a sensibilidade à sinalização por receptores de morte e contribui para decisões de destino celular durante a vigilância imune e a homeostase tecidual. Alterações na atividade da via de DR5 são frequentemente estudadas no contexto da biologia tumoral, regulação imune e resistência a estímulos apoptóticos em modelos de doença.
DR5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Tnfrsf10b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Tnfrsf10b. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Tnfrsf10b. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Tnfrsf10b interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.