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| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DOCK 8 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401727-NIC | 20 µg | $410.00 |
DOCK8 codifica o dedicator of cytokinesis 8, um fator de troca de nucleotídeos de guanina atípico que regula as GTPases da família Rho para coordenar a remodelação do citoesqueleto de actina, a polaridade celular e a integração de sinais a jusante de recetores imunitários. O DOCK8 sustenta a migração de linfócitos, a formação da sinapse imunitária e a sobrevivência celular, ligando a dinâmica do citoesqueleto a vias que controlam a adesão e o tráfego vesicular. Variantes com perda de função perturbam o controlo do citoesqueleto em células hematopoiéticas e estão associadas a fenótipos de imunodeficiência primária, caracterizados por respostas antivirais comprometidas e homeostase imunitária desregulada. Como um nó de sinalização que liga entradas de recetores a processos dependentes de actina, o DOCK8 é amplamente estudado na biologia dos leucócitos, nas interações hospedeiro–patógeno e no desenvolvimento de células imunitárias.
DOCK 8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DOCK8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DOCK8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DOCK8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DOCK8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.