Plasmide Double Nickase (h) DND1: sc-404161-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DND1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DND1 Double Nickase (h) et le plasmide DND1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DND1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DND1 Antibody (X22): sc-130493
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DND1 | sc-404161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DND1 | sc-404161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DND1 (dead end homolog 1) code une protéine liant l’ARN qui module la régulation génique post‑transcriptionnelle en se fixant à certains ARNm et en influençant leur stabilité et leur traduction. Elle est surtout caractérisée en biologie des cellules germinales, où elle contribue au maintien de l’identité germinale et favorise une différenciation correcte en amortissant les programmes d’expression génique. DND1 peut s’opposer à la répression médiée par les microARN sur des transcrits sélectionnés, ce qui la relie à des réseaux plus larges contrôlant le turnover de l’ARN et la temporalité du développement. La dérégulation des circuits de régulation de l’ARN associés à DND1 a été liée à un développement germinal aberrant et a été étudiée dans le contexte de la susceptibilité aux tumeurs germinales et de programmes oncogéniques associés.
DND1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DND1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DND1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DND1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DND1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.