Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
DnaJA4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406743
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- DnaJA4 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico DnaJA4, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DnaJA4 Anticuerpo (LL2): sc-100714
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
DnaJA4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406743 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
DNAJA4 codifica DnaJA4, un miembro de la familia de co-chaperonas Hsp40 (DnaJ) que se une a proteínas cliente no plegadas y estimula la actividad ATPasa de Hsp70 para favorecer el plegamiento adecuado, el replegamiento y la gestión (triaje) de proteínas mal plegadas. A través de estos procesos de control de calidad impulsados por chaperonas, DnaJA4 contribuye a redes de proteostasis que se interconectan con las respuestas celulares al estrés y las vías de recambio/degradación de proteínas. La actividad de chaperonas desregulada puede influir en la estabilidad y la función de proteínas de señalización, afectando rutas que gobiernan la supervivencia celular, la diferenciación y la adaptación al estrés. Una capacidad de proteostasis alterada es ampliamente relevante para la biología de enfermedades, incluidos contextos en los que el plegamiento aberrante de proteínas, la agregación o la señalización de estrés sostienen fenotipos patológicos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO DnaJA4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DNAJA4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DNAJA4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DNAJA4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DnaJA4.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DNAJA4 para la investigación de la señalización de DnaJA4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DNAJA4 críticos para la función de DnaJA4
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DNAJA4 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido DnaJA4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DnaJA4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DNAJA4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DnaJA4 (h) y el plásmido HDR DnaJA4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DNAJA4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DNAJA4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.