Dlx-3 Plasmide Double Nickase (m): sc-420014-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Dlx-3 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Dlx-3 Double Nickase Plasmid (m) e il Dlx-3 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Dlx3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Dlx-3 Antibody (B-5): sc-514094
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Dlx-3 Plasmide Double Nickase (m) | sc-420014-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dlx-3 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-420014-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Dlx3 codifica il fattore di trascrizione homeobox DLX-3, un regolatore nucleare che controlla la specificazione di linea e i programmi di differenziamento terminale durante lo sviluppo embrionale. Nel topo, DLX-3 contribuisce alle reti trascrizionali che governano la morfogenesi craniofacciale, il differenziamento dell’epidermide e dei follicoli piliferi e lo sviluppo dei denti, in parte attraverso la modulazione della segnalazione epitelio-mesenchimale e delle vie di cheratinizzazione a valle. Alterazioni dell’attività di Dlx3 sono state collegate a difetti di patterning dello sviluppo e a fenotipi di differenziamento deregolato, rendendolo rilevante per studi sulle malformazioni congenite e sull’omeostasi tissutale. In quanto fattore legante il DNA, DLX-3 rappresenta anche un nodo utile per investigare la regolazione genica guidata dagli enhancer e il cross-talk con altre proteine con dominio homeobox nei circuiti genici dello sviluppo.
Dlx-3 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Dlx3 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Dlx3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Dlx3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Dlx3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.