Dexras2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (r): sc-437366

Descripción general

Dexras2 (RASD2) es una pequeña proteína de unión a GTP relacionada con Ras, enriquecida en tejidos neurales, que funciona como un interruptor de señalización aguas abajo de los receptores acoplados a proteína G y de las vías de la sintasa neuronal de óxido nítrico. Ayuda a acoplar la estimulación del receptor con cambios en la señalización de nucleótidos cíclicos, respuestas dependientes de calcio y plasticidad sináptica mediante la modulación de la adenilil ciclasa y de cascadas de quinasas aguas abajo. En sistemas de rata, Dexras2 se ha utilizado para investigar mecanismos que controlan la señalización neuronal circadiana y asociada a la dopamina, con relevancia para fenotipos neuroconductuales y circuitos sensibles al estrés. La desregulación de nodos de señalización de la familia RAS como Dexras2 aporta información valiosa para estudiar la transducción de señales aberrante, la excitabilidad neuronal y la comunicación cruzada entre vías implicadas en la disfunción del SNC.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Dexras2 (r) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen en líneas celulares rat. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Dexras2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en para la investigación de la señalización de Dexras2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de críticos para la función de Dexras2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Dexras2 CRISPR/Cas9 KO (r) y el plásmido Dexras2 CRISPR/Cas9 KO (r2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus . Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Dexras2 (r) y el plásmido HDR Dexras2 (r2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.