desmoplakin I/II CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400818

개요

DSP는 데스모좀(desmosome)의 핵심 플라킨(plakin) 계열 구성요소인 데스모플라킨 I/II를 암호화하며, 중간섬유를 카드헤린 기반 접합 복합체에 고정함으로써 인접 세포 간 기계적 결합을 지지합니다. 데스모글레인/데스모콜린–플라코글로빈/플라코필린 복합체를 케라틴 또는 데스민 네트워크와 연결함으로써, 데스모플라킨은 상피 및 심장 조직의 구조적 무결성을 조율하고 분화 과정과 상처 관련 스트레스 반응 동안 접합부 리모델링을 조절하는 데 기여합니다. DSP의 기능 이상은 세포골격 조직화, 세포–세포 접착, 기계자극 반응성 신호전달을 교란하며, 표피와 심근에 영향을 미치는 유전성 및 후천성 질환과의 연관성이 확립되어 있습니다. 이러한 특성 때문에 DSP는 접합부 안정성, 세포골격 간 상호작용(cross-talk), 스트레스 유도 리모델링 경로를 연구하는 데 유용한 표적(노드)입니다.

desmoplakin I/II CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DSP 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DSP 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DSP의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 desmoplakin I/II 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 desmoplakin I/II 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DSP 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• desmoplakin I/II 기능에 중요한 DSP 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DSP 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• desmoplakin I/II CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 desmoplakin I/II CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DSP 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  desmoplakin I/II HDR 플라스미드 (h) 및 desmoplakin I/II HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DSP 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DSP 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.