Plasmide CRISPR/Cas9 KO DDX21 (h2): sc-405770-KO-2
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- DDX21 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique DDX21, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DDX21 Antibody (D-8): sc-376953
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO DDX21 (h2) | sc-405770-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
DDX21 est une hélicase ARN nucléolaire de type DEAD-box qui coordonne la maturation de l’ARNr, la biogenèse des ribosomes et, plus largement, le métabolisme de l’ARN en remodelant des complexes ARN–protéines. Elle participe aux réponses au stress nucléolaire et s’interface avec des programmes transcriptionnels qui couplent les signaux de croissance à la capacité de synthèse protéique, influençant la progression du cycle cellulaire et la protéostasie. DDX21 a également été impliquée dans la signalisation de l’immunité innée en modulant des voies dépendantes de l’ARN ainsi que l’expression de gènes stimulés par les interférons. Un dysfonctionnement de DDX21 et une biogenèse ribosomique altérée sont fréquemment étudiés dans le contexte de la transformation oncogénique, du stress génomique et de la biologie des infections virales.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO DDX21 (h2) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène DDX21 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du DDX21, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert DDX21 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine DDX21.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en DDX21 pour l'étude de la signalisation de DDX21, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de DDX21 essentiels à la fonction de DDX21
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de DDX21 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le DDX21 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le DDX21 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus DDX21. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le DDX21 plasmide HDR (h) et le DDX21 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie DDX21 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles DDX21 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.