Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) DAGLα: sc-402826-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)DAGLα consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa DAGLα (h) y el plásmido de doble nickasa DAGLα (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DAGLA. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DAGLα Anticuerpo (E-6): sc-390409
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) DAGLα | sc-402826-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) DAGLα | sc-402826-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DAGLA codifica la lipasa de diacilglicerol alfa (DAGLα), una hidrolasa de serina asociada a membrana que cataliza la formación del endocannabinoide 2-araquidonoilglicerol (2-AG) a partir de diacilglicerol. Al controlar la disponibilidad de 2-AG, DAGLα regula la señalización de los receptores cannabinoides y la plasticidad sináptica, conectando el metabolismo de los fosfolípidos con redes de señalización neuromoduladora. La actividad de DAGLα se integra con vías lipídicas de segundos mensajeros, incluidas la rotación del diacilglicerol dependiente de PLC y el equilibrio posterior entre eicosanoides y endocannabinoides. La desregulación de la señalización endocannabinoide y de la homeostasis lipídica en la que participa DAGLA se ha investigado en el contexto de fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, así como en biología metabólica e inflamatoria más amplia.
DAGLα El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DAGLA en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DAGLA. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DAGLA. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DAGLA alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.