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cystatin SN双切口酶质粒(h) | sc-405440-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cystatin SN双切口酶质粒(h2) | sc-405440-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CST1 编码胱抑素 SN(cystatin SN),这是一种分泌型的 2 型胱抑素,能够抑制组织蛋白酶(cathepsin)等木瓜蛋白酶样半胱氨酸蛋白酶,从而调控细胞外及细胞周围的蛋白水解过程。通过限制组织蛋白酶活性,胱抑素 SN 有助于维持上皮屏障稳态、调节炎症信号传导,并影响依赖蛋白酶的组织微环境重塑。已有报道显示,CST1 的表达在多种上皮相关疾病和癌症中发生改变;在这些情况下,蛋白酶与抗蛋白酶活性失衡可影响与侵袭相关的过程以及免疫细胞相互作用。因此,CST1 常被用于研究将蛋白水解控制与黏膜生物学、肿瘤相关重塑以及宿主—微生物应答联系起来的相关通路。
cystatin SN 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CST1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CST1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CST1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CST1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。