Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) CYPOR: sc-422345-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)CYPOR consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CYPOR (m) y el plásmido de doble nickasa CYPOR (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Por. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CYPOR Anticuerpo (F-10): sc-25270
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) CYPOR | sc-422345-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Por de ratón codifica la reductasa de citocromo P450 (CYPOR), una flavoproteína que transfiere electrones desde el NADPH a las enzimas microsomales del citocromo P450 y a otros socios redox. CYPOR es fundamental para el metabolismo oxidativo, ya que sostiene rutas implicadas en la eliminación de xenobióticos, la biosíntesis de esteroides y lípidos, y la homeostasis redox dentro del retículo endoplásmico. La alteración de la actividad de POR/CYPOR puede perturbar redes metabólicas dependientes de P450, influyendo en la susceptibilidad a interacciones fármaco–gen, en las respuestas al estrés oxidativo y en fenotipos relacionados con el sistema endocrino. Por ello, Por se estudia ampliamente en el metabolismo hepático, la biología del desarrollo y la regulación a nivel de sistemas de las vías de desintoxicación.
CYPOR El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Por en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Por. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Por. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Por alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.