Plásmido Doble Nickase (m) CYP4A10: sc-419927-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)CYP4A10 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CYP4A10 (m) y el plásmido de doble nickasa CYP4A10 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Cyp4a10. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) CYP4A10 | sc-419927-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) CYP4A10 | sc-419927-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cyp4a10 codifica la enzima del citocromo P450 murino CYP4A10, una monooxigenasa asociada al retículo endoplásmico que cataliza la ω-hidroxilación de ácidos grasos de cadena media y del ácido araquidónico para generar eicosanoides bioactivos como el 20-HETE. A través de estas reacciones, CYP4A10 influye en la homeostasis lipídica, en los programas metabólicos regulados por PPARα y en el metabolismo oxidativo renal y hepático. La actividad alterada de Cyp4a10 se ha vinculado a vías que afectan el tono vascular, el manejo de sodio y la señalización inflamatoria, lo que la hace relevante para estudios de fenotipos cardiometabólicos y renales. En modelos in vivo y basados en células se utiliza la perturbación de Cyp4a10 para dilucidar cómo la oxidación de ácidos grasos y la producción de eicosanoides moldean la fisiología tisular y las respuestas al estrés.
CYP4A10 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Cyp4a10 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Cyp4a10. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Cyp4a10. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Cyp4a10 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.