CYP2J6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419921

Descripción general

Cyp2j6 codifica la enzima del citocromo P450 CYP2J6, una monooxigenasa asociada al retículo endoplásmico que cataliza el metabolismo oxidativo de lípidos endógenos y xenobióticos. Las enzimas de la familia CYP2J contribuyen a la actividad epoxygenasa del ácido araquidónico, generando ácidos epoxieicosatrienoicos que modulan la señalización inflamatoria, el tono vascular y las respuestas celulares al estrés. A través de sus funciones en el equilibrio redox y la homeostasis de mediadores lipídicos, Cyp2j6 puede influir en vías vinculadas al metabolismo hepático y extrahepático, la regulación inmunitaria y la susceptibilidad al daño tisular inducido por tóxicos. La señalización lipídica dependiente de P450 alterada se aprovecha con frecuencia en modelos murinos para investigar mecanismos relevantes para la disfunción cardiometabólica y la biología de enfermedades inflamatorias.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CYP2J6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cyp2j6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cyp2j6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cyp2j6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CYP2J6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cyp2j6 para la investigación de la señalización de CYP2J6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Cyp2j6 críticos para la función de CYP2J6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cyp2j6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CYP2J6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CYP2J6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cyp2j6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CYP2J6 (m) y el plásmido HDR CYP2J6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cyp2j6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cyp2j6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.