Plasmide Double Nickase (m) CYP1B1: sc-419899-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) CYP1B1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CYP1B1 Double Nickase (m) et le plasmide CYP1B1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Cyp1b1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) CYP1B1 | sc-419899-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) CYP1B1 | sc-419899-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Cyp1b1** code l’enzyme du cytochrome P450 **CYP1B1**, une monooxygénase hème-thiolate qui catalyse le métabolisme oxydatif de substrats endogènes et de xénobiotiques, notamment des réactions d’hydroxylation pertinentes pour l’homéostasie des stéroïdes et des rétinoïdes. L’activité de CYP1B1 est associée à des programmes transcriptionnels pilotés par l’AHR et à des voies métaboliques de phase I qui modulent les réponses cellulaires aux ligands environnementaux et au stress oxydant. Par son influence sur l’équilibre rédox et la production de métabolites bioactifs, **Cyp1b1** a été étudié dans le contexte de la biologie vasculaire, du développement oculaire et de la susceptibilité tissulaire spécifique aux lésions induites par des toxiques. Dans des modèles murins, une altération de la fonction de **Cyp1b1** peut modifier des réseaux de signalisation en aval d’intermédiaires métaboliques, soutenant des recherches mécanistiques sur les liens entre métabolisme et inflammation ainsi que sur des phénotypes associés au développement.
CYP1B1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Cyp1b1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Cyp1b1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Cyp1b1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Cyp1b1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.