Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) cyclin T1: sc-400623-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)cyclin T1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa cyclin T1 (h) y el plásmido de doble nickasa cyclin T1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CCNT1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: cyclin T1 Anticuerpo (E-3): sc-271348
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) cyclin T1 | sc-400623-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) cyclin T1 | sc-400623-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCNT1 codifica la ciclina T1, una subunidad reguladora del complejo P-TEFb que se asocia con CDK9 para fosforilar el dominio C-terminal de la ARN polimerasa II y promover la elongación transcripcional. Mediante el control de la liberación de la pausa, la ciclina T1 influye en programas de expresión génica sensibles a estímulos, la progresión del ciclo celular y redes transcripcionales asociadas a la diferenciación. La actividad de P-TEFb dependiente de CCNT1 también se integra con la regulación de la cromatina y el procesamiento de ARN, vinculando la dinámica de la transcripción con circuitos más amplios de regulación génica. La señalización desregulada de ciclina T1/CDK9 se ha implicado en estados transcripcionales oncogénicos y en otros trastornos caracterizados por un control transcripcional alterado, lo que respalda su uso en estudios mecanísticos de fenotipos dependientes de la transcripción.
cyclin T1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CCNT1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CCNT1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CCNT1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CCNT1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.