cyclin D1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400047

개요

CCND1은 사이클린 D1을 암호화하며, CDK4/6을 활성화해 RB 계열 단백질을 인산화하고 E2F 의존적 전사를 촉진함으로써 G1/S 세포주기 전이를 조절하는 핵심 조절자입니다. 사이클린 D1은 RTK–RAS–MAPK 및 PI3K–AKT와 같은 경로 하위에서 유사분열 촉진(미토제닉) 신호와 영양 신호를 통합하여, 증식이 성장 조절 및 체크포인트의 무결성과 조화를 이루도록 합니다. CCND1의 발현 이상 또는 복제수 증가(copy number gain)는 비정상적인 세포주기 진입과 유전체 불안정성과 흔히 연관되며, 종양형성과 종양유발 신호 네트워크에서 자주 연구되는 대표적 분자 특징입니다.

cyclin D1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CCND1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CCND1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CCND1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 cyclin D1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 cyclin D1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CCND1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• cyclin D1 기능에 중요한 CCND1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CCND1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• cyclin D1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 cyclin D1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CCND1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  cyclin D1 HDR 플라스미드 (h) 및 cyclin D1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CCND1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CCND1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.