Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
CXXC5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403248
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CXXC5 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CXXC5, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CXXC5 Anticuerpo (H-6): sc-376348
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CXXC5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403248 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CXXC5 (proteína 5 con dedo de zinc tipo CXXC) es un regulador nuclear y citoplasmático que se une a ADN rico en CpG mediante su dominio CXXC y se vincula al control epigenético de la transcripción. Actúa como un modulador dependiente del contexto de la señalización Wnt/β-catenina y participa en vías que gobiernan decisiones de destino celular, proliferación y diferenciación, con funciones descritas en programas hematopoyéticos y neuronales. CXXC5 también conecta la señalización de factores de crecimiento y de estrés con resultados transcripcionales, influyendo en procesos asociados a la cromatina y en la dinámica de la expresión génica. La expresión desregulada de CXXC5 se ha asociado con señalización Wnt aberrante y con estados de diferenciación alterados observados en múltiples contextos relevantes para enfermedades, lo que respalda su estudio en mecanismos del desarrollo y de la señalización oncogénica.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CXXC5 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CXXC5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CXXC5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CXXC5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CXXC5.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CXXC5 para la investigación de la señalización de CXXC5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CXXC5 críticos para la función de CXXC5
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CXXC5 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CXXC5 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CXXC5 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CXXC5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CXXC5 (h) y el plásmido HDR CXXC5 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CXXC5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CXXC5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.