CTDSPL2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-435953

Übersicht

Ctdspl2 kodiert CTDSPL2, ein kleines, C‑terminales Domänenphosphatase‑ähnliches Protein, das an der Regulation phosphorylierungsabhängiger Signalwege und Transkriptionsprogramme beteiligt ist. Mitglieder dieser Phosphatasefamilie werden mit der Kontrolle der Dephosphorylierungsdynamik der CTD (C‑terminalen Domäne) der RNA‑Polymerase II sowie mit umfassenderen phosphoregulatorischen Schaltkreisen in Verbindung gebracht, die den Zellzyklus, die Differenzierung und die Aufrechterhaltung der zellulären Identität beeinflussen. In Mausmodellen dient CTDSPL2 als mechanistischer Ansatzpunkt, um zu untersuchen, wie phosphatasevermittelte Schalter mit der Transkriptionskontrolle und chromatinassoziierten Prozessen zusammenwirken. Eine veränderte Regulation von CTD‑Phosphatasen und verwandten Signalknoten ist für Modelle aberranter Proliferation und Störungen der Linienfestlegung relevant und unterstützt Untersuchungen in onkologisch und entwicklungsbiologisch ausgerichteten Forschungskontexten.

Das CTDSPL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Ctdspl2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Ctdspl2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Ctdspl2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CTDSPL2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Ctdspl2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CTDSPL2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Ctdspl2-Exone abzielen, die für die CTDSPL2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Ctdspl2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CTDSPL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom CTDSPL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Ctdspl2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CTDSPL2 HDR-Plasmid (m) und CTDSPL2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Ctdspl2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Ctdspl2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.