Plásmido Doble Nickase (h) CREB3L4: sc-417626-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CREB3L4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CREB3L4 (h) y el plásmido de doble nickasa CREB3L4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CREB3L4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CREB3L4 Anticuerpo (D-8): sc-514052
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CREB3L4 | sc-417626-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CREB3L4 | sc-417626-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CREB3L4 (proteína 3 similar a CREB de unión a elementos de respuesta a cAMP 4) es un factor de transcripción bZIP anclado a la membrana del retículo endoplásmico (RE) que puede activarse mediante proteólisis intramembrana regulada para modular programas de expresión génica vinculados a la homeostasis de la vía secretora. Participa en respuestas celulares relacionadas con la señalización de estrés del RE y con redes transcripcionales asociadas a la respuesta a proteínas mal plegadas, influyendo en la diferenciación y la adaptación metabólica. La actividad de CREB3L4 se ha estudiado en tejidos sensibles a hormonas y en cánceres, donde la expresión alterada o los resultados transcripcionales aguas abajo pueden correlacionarse con cambios en la proliferación, la señalización de supervivencia y fenotipos invasivos. Estas propiedades hacen de CREB3L4 una diana útil para desentrañar mecanismos de control transcripcional que conectan la función del RE con estados celulares asociados a enfermedad.
CREB3L4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CREB3L4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CREB3L4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CREB3L4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CREB3L4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.