Plasmide Double Nickase (h) COL11A1: sc-403512-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) COL11A1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide COL11A1 Double Nickase (h) et le plasmide COL11A1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant COL11A1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) COL11A1 | sc-403512-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) COL11A1 | sc-403512-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COL11A1 code la chaîne α1 du collagène de type XI, un collagène fibrillaire quantitativement minoritaire mais fonctionnellement important, qui s’assemble avec le collagène de type II pour réguler le diamètre des fibrilles de collagène, leur espacement et leurs propriétés de résistance à la traction dans la matrice extracellulaire. Il est particulièrement pertinent pour la biologie du cartilage et des tissus conjonctifs, où il contribue à l’organisation de la matrice, à la différenciation des chondrocytes et aux voies de signalisation liées à la mécanotransduction. Des altérations de l’expression ou de la séquence de COL11A1 ont été associées à des phénotypes de remodelage de la matrice extracellulaire et à des troubles du tissu conjonctif, et le gène est fréquemment étudié dans le contexte des signatures stromales et de la desmoplasie du microenvironnement tumoral. En tant que gène structural de la MEC, COL11A1 constitue un point d’entrée exploitable pour étudier des voies dépendantes de la matrice, notamment l’adhésion médiée par les intégrines, la dynamique des adhésions focales et les programmes de remodelage associés au TGF-β.
COL11A1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus COL11A1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de COL11A1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de COL11A1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de COL11A1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.