CLN5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408473-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CLN5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CLN5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CLN5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CLN5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CLN5 Anticorpo (D-8): sc-374672
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CLN5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408473-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CLN5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408473-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CLN5 codifica uma glicoproteína lisossomal solúvel implicada no tráfego endolisossomal e na proteostase, sustentando o funcionamento adequado dos lisossomos e a renovação de macromoléculas celulares. A atividade de CLN5 está ligada a vias relacionadas aos lisossomos, incluindo o fluxo autofagia–lisossomo, o transporte vesicular e a manutenção da homeostase neuronal. Variantes de perda de função em CLN5 estão associadas à lipofuscinose ceróide neuronal, caracterizada por patologia de armazenamento lisossomal e neurodegeneração progressiva, tornando CLN5 um alvo-chave para o estudo de mecanismos de disfunção lisossomal. Em modelos de células humanas, a perturbação de CLN5 é comumente usada para investigar o processamento de enzimas lisossomais, a triagem de cargas e o acúmulo de material de armazenamento.
CLN5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CLN5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CLN5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CLN5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CLN5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.