Plásmido Doble Nickase (h) CLK4: sc-404084-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CLK4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CLK4 (h) y el plásmido de doble nickasa CLK4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CLK4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CLK4 | sc-404084-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CLK4 | sc-404084-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La quinasa 4 tipo CDC (CLK4) es una proteína quinasa de doble especificidad que fosforila factores de empalme ricos en serina/arginina (SR), vinculando señales de entrada con el ensamblaje del espliceosoma y con decisiones de empalme alternativo del pre-ARNm. Al modular la dinámica de fosforilación de las proteínas SR, CLK4 contribuye al procesamiento del ARNm, al acoplamiento transcripción–empalme y a programas más amplios de metabolismo del ARN que moldean la progresión del ciclo celular y la expresión génica adaptativa al estrés. La actividad desregulada de la familia CLK puede alterar patrones de empalme que influyen en redes de señalización oncogénica, respuestas al daño del ADN y estados de diferenciación, lo que convierte a CLK4 en un nodo relevante para estudios mecanísticos de fenotipos asociados al empalme. Por ello, la CLK4 humana se investiga con frecuencia en contextos en los que el cambio de isoformas transcripcionales y el control del empalme regulado por quinasas son centrales para el comportamiento celular relevante para la enfermedad.
CLK4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CLK4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CLK4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CLK4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CLK4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.