Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CIP2A Plasmide Double Nickase (h): sc-401363-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CIP2A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CIP2A Double Nickase Plasmid (h) e il CIP2A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CIP2A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CIP2A Antibody (HL1925): sc-80662
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CIP2A Plasmide Double Nickase (h) | sc-401363-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CIP2A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401363-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La CIP2A umana (cellular inhibitor of PP2A) codifica un’oncoproteina che sopprime l’attività fosfatasica oncosoppressiva di PP2A, mantenendo così gli output di segnalazione dipendenti dalla fosforilazione. Stabilizzando fattori come c-MYC e sostenendo il flusso delle vie PI3K/AKT e MAPK, CIP2A contribuisce alla progressione del ciclo cellulare, ai segnali di sopravvivenza e ai programmi di risposta allo stress. L’espressione deregolata di CIP2A è frequentemente associata a fenotipi proliferativi e invasivi in molteplici contesti tumorali ed è utilizzata come nodo meccanicistico per interrogare reti di segnalazione controllate da fosfatasi. CIP2A è pertanto ampiamente studiata per il suo impatto sull’amplificazione dei segnali oncogenici, sulla regolazione trascrizionale associata alla cromatina e sul controllo dei feedback di via.
CIP2A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CIP2A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CIP2A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CIP2A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CIP2A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.