CDKN2B/p15 INK4B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400570-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CDKN2B/p15 INK4BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CDKN2B/p15 INK4B (h) e o Plasmídeo Double Nickase CDKN2B/p15 INK4B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDKN2B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CDKN2B/p15 INK4B Anticorpo (D-12): sc-271791
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CDKN2B/p15 INK4B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400570-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CDKN2B/p15 INK4B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400570-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDKN2B codifica a p15^INK4B, um inibidor de quinases dependentes de ciclina que se liga a CDK4/6 para restringir a fosforilação de RB e impor o checkpoint de G1/S. Como um nó central do controlo do ciclo celular, o CDKN2B integra sinais de vias antiproliferativas, como TGF-β/SMAD, e de programas mais amplos de senescência que limitam a proliferação inadequada. A regulação alterada de CDKN2B, incluindo deleção, metilação do promotor ou rutura/disrupção do locus em 9p21, está frequentemente associada à perda do controlo do crescimento em diversas neoplasias e a fenótipos ligados à proliferação aberrante. Esta biologia torna o CDKN2B um alvo útil para estudar a imposição de checkpoints, o escape à senescência e as interações entre vias que convergem na sinalização CDK4/6–RB.
CDKN2B/p15 INK4B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDKN2B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDKN2B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDKN2B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDKN2B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.