Plásmido Doble Nickase (h) CDIP: sc-409425-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CDIP consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CDIP (h) y el plásmido de doble nickasa CDIP (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CDIP1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CDIP | sc-409425-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CDIP | sc-409425-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDIP1 codifica CDIP, una proteína sensible al estrés identificada originalmente como diana de p53, que contribuye a la señalización apoptótica y a las decisiones de destino celular bajo estrés genotóxico y oxidativo. CDIP se ha vinculado a las vías mitocondriales de la apoptosis y a la modulación de las respuestas al daño del ADN, intersectando con programas transcripcionales regulados por p53 y con la activación posterior de caspasas. La actividad alterada de CDIP1/CDIP se ha asociado con una señalización de supervivencia desregulada en contextos relacionados con el cáncer, incluidos efectos sobre la sensibilidad de las células tumorales al estrés y al daño asociado a la quimioterapia. Estas propiedades hacen de CDIP1 un nodo útil para estudiar los mecanismos de apoptosis, la adaptación al estrés y la reconfiguración de la vía de p53 en células humanas.
CDIP El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CDIP1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CDIP1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CDIP1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CDIP1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.