Plasmide Double Nickase (h) CD93: sc-407484-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD93 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD93 Double Nickase (h) et le plasmide CD93 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CD93. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD93 Antibody (B-1): sc-365172
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD93 | sc-407484-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD93 | sc-407484-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD93 est une glycoprotéine transmembranaire de type I exprimée de façon marquée par les cellules endothéliales et les cellules de la lignée myéloïde, où elle participe à la signalisation associée à l’adhérence et à la régulation des réponses inflammatoires. Elle interagit avec la matrice extracellulaire et des processus liés au complément afin de moduler le trafic leucocytaire, l’efférocytose et l’homéostasie vasculaire, reliant l’activité immunitaire innée au remodelage tissulaire. L’activité de CD93 est couramment étudiée dans le cadre des programmes angiogéniques, de la fonction de barrière endothéliale et du comportement des monocytes/macrophages, des processus souvent perturbés dans les états de maladie inflammatoire chronique. Des modifications de l’expression de CD93 ont été rapportées dans diverses pathologies impliquant le système immunitaire et le compartiment vasculaire, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques des interactions immuno‑stromales.
CD93 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD93 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD93. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD93. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD93.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.