Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD84 (h): sc-416482

Présentation

CD84 est un récepteur de la famille SLAM, appartenant à la superfamille des immunoglobulines, exprimé principalement à la surface des cellules immunitaires, où il participe à l’adhésion homophilique et à la co-stimulation, modulant ainsi l’activation des lymphocytes et la communication intercellulaire. Par ses associations avec des protéines adaptatrices telles que SH2D1A/SAP et des kinases en aval, CD84 influence des événements de signalisation liés à la formation de la synapse immunologique, aux réponses cytokiniques et à la régulation des interactions entre cellules B et cellules T. Une expression ou une signalisation de CD84 altérée a été rapportée dans des contextes de dérégulation immunitaire, notamment lors d’états inflammatoires et de phénotypes immunitaires associés aux hémopathies malignes. En tant que nœud immunorégulateur de surface, CD84 est fréquemment étudié dans les voies qui gouvernent l’activation et la différenciation des leucocytes, ainsi que la signalisation dépendante des contacts cellule–cellule.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CD84 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CD84 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CD84, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CD84 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CD84.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CD84 pour l'étude de la signalisation de CD84, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de CD84 essentiels à la fonction de CD84
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CD84 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le CD84 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CD84 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CD84. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le CD84 plasmide HDR (h) et le CD84 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CD84 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CD84 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.