CD64 Lentiviral Activation Particles (m): sc-420305-LAC

Das Mausgen *Fcgr1* kodiert CD64 (FcγRI), einen hochaffinen IgG-Fc-Rezeptor, der überwiegend auf Monozyten, Makrophagen, dendritischen Zellen und aktivierten Neutrophilen exprimiert wird. CD64 verknüpft die Erkennung von Immunkomplexen mit der Signalübertragung über die FcR-γ-Kette und fördert eine ITAM-abhängige Aktivierung von Syk sowie nachgeschalteter Signalwege wie PI3K–AKT, MAPK und NF-κB, die Phagozytose, oxidativen Burst, Zytokinproduktion und Antigenpräsentation regulieren. Über diese Prozesse beeinflusst *Fcgr1* die angeborene Immunsensorik, die Polarisierung myeloider Zellen und die Wechselwirkungen mit der adaptiven Immunität. Eine fehlregulierte CD64-Aktivität oder -Expression wird in Mausmodellen häufig als Marker und mechanistischer Knotenpunkt in Studien zu Entzündung, Infektion und autoimmunähnlicher Immunkomplex-Pathologie verwendet.

CD64 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Fcgr1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD64 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Fcgr1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD64-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Fcgr1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.