Particules Lentivirales d'Activation (h) CD26: sc-400862-LAC

Le gène humain DPP4 code la CD26, une glycoprotéine transmembranaire de type II dotée d’une activité dipeptidyl‑peptidase qui tronque certaines hormones incrétines, chimiokines et neuropeptides, modulant ainsi la signalisation médiée par des peptides dans les tissus immunitaires et métaboliques. Au-delà de son rôle enzymatique, la CD26 participe à la signalisation co‑stimulatrice des lymphocytes T et module les interactions cellule–cellule et cellule–matrice via des partenaires de liaison tels que l’adénosine désaminase et des composants de la matrice extracellulaire. DPP4/CD26 s’inscrit à l’interface de voies contrôlant l’inflammation, la chimiotaxie et l’homéostasie du glucose, et son expression est régulée de manière dynamique dans les compartiments épithélial, endothélial et hématopoïétique. Une activité altérée de DPP4 ou une expression modifiée de CD26 a été associée à des dysrégulations immunitaires, à des traits cardiométaboliques et à la biologie tumorale, ce qui soutient son utilisation comme nœud mécanistique dans des études centrées sur les voies de signalisation.

Les particules d'activation lentivirales CD26 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de DPP4 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales CD26 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription DPP4, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de CD26. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif DPP4 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.