Partículas Lentivirales de Activación (h) CD21: sc-401352-LAC

CR2 codifica CD21 (receptor del complemento 2), un receptor de superficie enriquecido en células B que se une a antígenos marcados con C3d y acopla las señales innatas del complemento con la inmunidad humoral adaptativa. CD21 funciona dentro del complejo correceptor CD19–CD81 para reducir los umbrales de activación de las células B, potenciar la señalización del BCR y favorecer la captura y retención de antígenos en las células dendríticas foliculares, modulando las reacciones del centro germinal. A través de estas funciones, CR2/CD21 influye en procesos como la opsonización dependiente del complemento, la maduración de las células B y la formación de memoria inmunológica. La expresión o señalización desregulada de CR2 se ha asociado con respuestas alteradas de células B en contextos de enfermedades autoinmunes e infecciosas, y con frecuencia se utiliza como marcador y nodo funcional en estudios de biología de células B.

Las partículas de activación lentiviral CD21 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de CR2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral CD21 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción CR2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de CD21. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo CR2 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.