Particules Lentivirales d'Activation (h) CD16: sc-400544-LAC

Le gène humain **FCGR3A** code **CD16 (FcγRIIIa)**, un récepteur Fc de faible affinité pour les IgG, fortement exprimé par les cellules NK (natural killer), les macrophages et certains sous-types de monocytes. La liaison de CD16 aux complexes immuns déclenche une signalisation via des chaînes adaptatrices porteuses d’ITAM (FcRγ/CD3ζ), activant des voies dépendantes de Src/Syk qui régulent la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps, la phagocytose, la production de cytokines et la modulation des seuils de l’immunité innée. Les variations d’expression de **FCGR3A** et de l’activité du récepteur influencent les fonctions effectrices médiées par le Fc et ont été associées à des phénotypes de dérégulation immunitaire étudiés dans l’auto-immunité, les infections chroniques et l’immunobiologie du cancer. Ces propriétés font de CD16 un marqueur largement utilisé et un nœud fonctionnel clé pour explorer la signalisation des récepteurs Fc, les programmes d’activation des cellules NK et la biologie des anticorps et des complexes immuns.

Les particules d'activation lentivirales CD16 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de FCGR3A dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales CD16 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription FCGR3A, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de CD16. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif FCGR3A ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.