Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO caveolin-3 (m): sc-419481
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- caveolin-3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique caveolin-3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: caveolin-3 Antibody (A-3): sc-5310
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO caveolin-3 (m) | sc-419481 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin **Cav3** code la **cavéoline‑3**, une protéine d’échafaudage des cavéoles enrichie dans le muscle, qui organise des microdomaines membranaires et coordonne la signalisation au niveau du sarcolemme. La cavéoline‑3 module des processus tels que la mécanotransduction, le trafic vésiculaire et la localisation des canaux ioniques, influençant des voies comme la signalisation **PI3K–AKT** et la régulation de l’oxyde nitrique dans le muscle strié. Une altération de la fonction de **CAV3** est associée à une perturbation de la stabilité membranaire et de l’homéostasie des signaux dans les muscles squelettique et cardiaque, ce qui souligne sa pertinence pour des modèles de myopathie et de cardiomyopathie. **Cav3** est donc largement utilisé pour étudier le contrôle de la physiologie musculaire dépendant des cavéoles, la réparation membranaire et la compartimentation des signaux.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO caveolin-3 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cav3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cav3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cav3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine caveolin-3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cav3 pour l'étude de la signalisation de caveolin-3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Cav3 essentiels à la fonction de caveolin-3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cav3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le caveolin-3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le caveolin-3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cav3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le caveolin-3 plasmide HDR (m) et le caveolin-3 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cav3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cav3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.