C4BP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419394

Descripción general

Mouse C4bp codifica la proteína fijadora de C4b (C4BP), un regulador soluble de las vías clásica y de lectinas del complemento que se une a C4b activado para favorecer su inactivación mediada por el factor I y limitar la formación de la convertasa de C3. Al restringir la amplificación del complemento, C4BP ayuda a mantener la homeostasis inmunitaria, favorece la eliminación de complejos inmunes y material apoptótico, y modula la señalización inflamatoria en el medio extracelular. La desregulación del control del complemento en el que participa C4BP se ha implicado en contextos como la autoinmunidad, la inflamación asociada a infecciones y la lesión tisular, donde la activación excesiva del complemento contribuye a la patología. Como nodo regulador del complemento, C4bp es relevante para el estudio de la inmunidad innata, las redes inflamatorias y las interacciones huésped–patógeno en modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO C4BP (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen C4bp en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del C4bp junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de C4bp tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína C4BP.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en C4bp para la investigación de la señalización de C4BP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de C4bp críticos para la función de C4BP
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de C4bp para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido C4BP CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido C4BP CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus C4bp. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR C4BP (m) y el plásmido HDR C4BP (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología C4bp para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana C4bp definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.