C1r Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405842
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- C1r El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico C1r, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: C1r Anticuerpo (F-7): sc-514105
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
C1r Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405842 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
C1R codifica el componente del complemento C1r, una serinproteasa que forma el complejo C1 junto con C1q y C1s para iniciar la vía clásica del complemento. Tras su activación, C1r sufre autoactivación y escinde C1s, propagando la señalización de la cascada del complemento que impulsa la opsonización, la eliminación de complejos inmunes y la generación de mediadores inflamatorios. La actividad de C1r se ha relacionado con la regulación de la vigilancia inmunitaria innata y con la comunicación cruzada con las vías de coagulación e inflamación en el medio extracelular. La desregulación de C1R se ha asociado con estados alterados de activación del complemento y con patología mediada por el sistema inmunitario, lo que la hace relevante para estudios de la biología del complemento y de los mecanismos de enfermedad relacionados con la inflamación.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO C1r (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen C1R en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del C1R junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de C1R tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína C1r.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en C1R para la investigación de la señalización de C1r, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de C1R críticos para la función de C1r
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de C1R para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido C1r CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido C1r CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus C1R. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR C1r (h) y el plásmido HDR C1r (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología C1R para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana C1R definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.