C/EBP δ Lentiviral Activation Particles (m): sc-419624-LAC

Cebpd kodiert den Transkriptionsfaktor C/EBPδ, ein basisches Leucin-Zipper-Protein, das als Antwort auf Entzündungs- und Stresssignale induzierbare Genexpressionsprogramme reguliert. Es integriert nachgeschaltete Signalwege von Zytokinen und angeborenen Immunpfaden, darunter NF-κB und JAK/STAT, um die transkriptionelle Kontrolle von Akutphasenreaktionen, Makrophagenaktivierung und metabolischer Anpassung zu koordinieren. In Mausgeweben trägt C/EBPδ zur Zellzykluskontrolle, Differenzierung und seneszenzassoziierten transkriptionellen Umgestaltung bei, mit kontextabhängigen Rollen in epithelialen, stromalen und Immun-Kompartimenten. Eine dysregulierte C/EBPδ-Aktivität wurde mit chronischen Entzündungen und tumorassoziierten Programmen des Mikromilieus in Verbindung gebracht, was es für mechanistische Studien zur Immunregulation und Krebsbiologie relevant macht.

C/EBP δ Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Cebpd-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

C/EBP δ Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Cebpd-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen C/EBP δ-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Cebpd-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.