Plásmido Doble Nickase (m) C/EBP δ: sc-419624-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)C/EBP δ consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa C/EBP δ (m) y el plásmido de doble nickasa C/EBP δ (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Cebpd. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: C/EBP δ Anticuerpo (D-1): sc-515028
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) C/EBP δ | sc-419624-NIC | 20 µg | $410.00 |
Cebpd codifica C/EBPδ, un factor de transcripción de tipo cremallera de leucina básica que modula programas inducibles de expresión génica que controlan la inflamación, la diferenciación y las respuestas al estrés celular en tejidos de ratón. C/EBPδ integra señales aguas abajo de citocinas y de vías de receptores tipo Toll, moldeando salidas transcripcionales que influyen en la activación mieloide, la adipogénesis y la remodelación tisular. Su actividad se entrecruza con redes asociadas a MAPK y NF-κB y contribuye a la regulación de la detención del ciclo celular y la supervivencia bajo estrés. La expresión desregulada de C/EBPδ se ha asociado con fisiopatología inflamatoria y con funciones dependientes del contexto en la biología del cáncer, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos del control transcripcional en modelos de enfermedad.
C/EBP δ El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Cebpd en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Cebpd. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Cebpd. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Cebpd alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.