Plásmido Doble Nickase (h) C/EBP beta: sc-400125-NIC

CEBPB codifica C/EBP beta, un factor de transcripción de cremallera de leucina básica que regula la determinación de linaje y la expresión génica sensible al estrés en células hematopoyéticas y mesenquimales. Integra señales de citocinas y factores de crecimiento aguas abajo de vías como JAK/STAT, MAPK y NF-κB para controlar programas vinculados a la inflamación, las respuestas de fase aguda, la adipogénesis y la activación de macrófagos. C/EBP beta también coordina decisiones del ciclo celular y de supervivencia mediante redes transcripcionales dependientes del contexto, incluida la cooperación con AP-1 y otros miembros de la familia C/EBP. La actividad desregulada de CEBPB se ha asociado con señalización inflamatoria aberrante, estados de diferenciación alterados y fenotipos transcripcionales promotores de tumores en múltiples modelos relevantes para el cáncer.

C/EBP beta El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CEBPB en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CEBPB. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CEBPB. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CEBPB alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.