c-Abl Double Nickase Plasmid (m): sc-418935-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das c-Abl Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- c-Abl Double-Nickase-Plasmid (m) und c-Abl Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Abl1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
c-Abl Double Nickase Plasmid (m) | sc-418935-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
c-Abl Double Nickase Plasmid (m2) | sc-418935-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das murine Abl1 kodiert die nichtrezeptorartige Tyrosinkinase c-Abl, einen multifunktionalen Signal-Knotenpunkt, der Wachstumsfaktor- und Integrin-Signale integriert, um den Umbau des Zytoskeletts, Zelladhäsion und -migration, Endozytose sowie die Kontrolle von Zellzyklus-Checkpoints zu regulieren. Die c-Abl-Aktivität ist mit der DNA-Schadenssignalgebung und Stressantwortwegen verknüpft und moduliert phosphorylierungsabhängige Netzwerke, die Apoptose, Differenzierung und transkriptionelle Programme beeinflussen. Eine fehlregulierte Abl1/c-Abl-Signalgebung und veränderte Kinasekontrolle werden häufig im Kontext onkogener Transformation und aberranter proliferativer Signalwege untersucht, während Störungen der c-Abl-abhängigen Aktindynamik für Invasion und Gewebeumbau relevant sind. In Mausmodellen wird Abl1 oft eingesetzt, um kinasegetriebene Signalkreisläufe zu analysieren und genotoxische Stressantworten mit Veränderungen des Zellschicksals zu verknüpfen.
c-Abl Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Abl1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Abl1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Abl1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Abl1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.