BTNL9 Double Nickase Plasmid (h2): sc-414736-NIC-2
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das BTNL9 Double Nickase Plasmid (h2) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- BTNL9 Double-Nickase-Plasmid (h2) und BTNL9 Double-Nickase-Plasmid (h22) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf BTNL9 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
BTNL9 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-414736-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane BTNL9 (butyrophilin-like 9) kodiert ein Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie, das an der Regulation der Kommunikation von Immunzellen an epithelialen und mukosalen Grenzflächen beteiligt ist, wobei Rollen in der Modulation von T‑Zell- und angeboren-ähnlichen Lymphozytenantworten über butyrophilinverwandte ko-regulatorische Mechanismen vorgeschlagen werden. Expressionsmuster von BTNL9 deuten auf eine Beteiligung an Immunüberwachung, Barrierehomöostase und entzündlichen Signalwegen hin, die lokale Zytokinmilieus und antigengetriebene Aktivierungszustände prägen. Genetische und transkriptomische Studien haben veränderte BTNL9-Aktivität mit immunvermittelten Erkrankungen sowie mit krebsassoziierten Veränderungen des immunologischen Mikromilieus in Verbindung gebracht, was seine Nutzung als molekularen Ansatzpunkt zur Untersuchung der Immunregulation in Krankheitskontexten unterstützt. Das Gene Editing von BTNL9 in humanen Zellmodellen ermöglicht die funktionelle Aufschlüsselung der Signalgebung der BTNL-Familie, die Bewertung von Effekten auf die Lymphozytenaktivierung und den epithelial-immunologischen Crosstalk sowie die Validierung von BTNL9-assoziierten Varianten in mechanistischen Workflows.
BTNL9 Das Double-Nickase-Plasmid (h2) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des BTNL9-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von BTNL9 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die BTNL9-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit BTNL9-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.