Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Brm: sc-401049-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Brm consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Brm (h) y el plásmido de doble nickasa Brm (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SMARCA2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Brm Anticuerpo (E-1): sc-17828
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Brm | sc-401049-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Brm | sc-401049-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMARCA2 codifica Brm, una subunidad catalítica dependiente de ATP del complejo de remodelación de cromatina SWI/SNF (BAF), que reposiciona nucleosomas para regular la transcripción, la accesibilidad de los potenciadores (enhancers) y otros procesos dependientes del ADN. Brm integra señales de factores de transcripción específicos de linaje para modular programas que controlan la progresión del ciclo celular, la diferenciación y las respuestas al daño del ADN, y coopera con otros componentes de BAF para moldear los estados de la cromatina. Debido a sus funciones en la organización de la cromatina y el control transcripcional, SMARCA2 se estudia con frecuencia en el contexto de la desregulación epigenética y de programas alterados de expresión génica proliferativos o del desarrollo observados en el cáncer y otros trastornos que implican defectos en la remodelación de la cromatina.
Brm El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SMARCA2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SMARCA2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SMARCA2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SMARCA2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.