BRD2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-402584-LAC

BRD2 kodiert das Bromodomänen-haltige Protein 2, einen Chromatin-„Reader“ der BET-Familie, der an acetylierte Histone bindet und so die Initiation und Elongation der Transkription koordiniert. BRD2 trägt über Interaktionen mit Transkriptionskomplexen und der Chromatin-Remodeling-Maschinerie zur Regulation der Zellzyklusprogression, von DNA-Schadensantworten und inflammatorischen Genprogrammen bei. Es wirkt an der epigenetischen Kontrolle der Genexpression in Signalwegen mit, die mit Proliferation und Immun-Signaling verknüpft sind, und eine veränderte BRD2-Aktivität wurde mit dysregulierten Transkriptionszuständen in Krebs und entzündlichen Erkrankungen in Verbindung gebracht. Diese Eigenschaften machen BRD2 zu einem relevanten Ziel für die Untersuchung chromatinabhängiger Transkription, der Enhancer-Funktion und stimulusabhängiger Genregulation in menschlichen Zellen.

BRD2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente BRD2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

BRD2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der BRD2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen BRD2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen BRD2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.