BRCA2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400700-LAC

BRCA2 kodiert einen zentralen Tumorsuppressor, der die Integrität des Genoms schützt, indem er die hochpräzise Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen durch homologe Rekombination koordiniert. BRCA2 fördert die Bildung von RAD51-Filamenten und reguliert den Schutz der Replikationsgabel, wodurch es mit der Signalübertragung der DNA-Schadensantwort, der Kontrolle des S‑Phasen-Checkpoints und der Aufrechterhaltung der chromosomalen Stabilität verknüpft ist. Eine Störung oder Fehlregulation der BRCA2-Funktion ist stark mit einer erhöhten Anfälligkeit für erbliche und sporadische Krebserkrankungen verbunden, was seine Rolle bei der Verhinderung der Anhäufung von Mutationen und aberranter Rekombination widerspiegelt. BRCA2 wird daher intensiv in Signalwegen untersucht, die Replikationsstress, rekombinationsvermittelte Reparatur und Phänotypen der Genomstabilität betreffen, die für die onkogene Transformation relevant sind.

BRCA2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente BRCA2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

BRCA2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der BRCA2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen BRCA2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen BRCA2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.