BMP-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400514

Descripción general

BMP2 codifica la proteína morfogenética ósea 2 (BMP-2), un ligando secretado de la superfamilia TGF-β que señaliza principalmente a través de receptores de serina/treonina quinasas de tipo I/II para activar SMAD1/5/8 e interactuar con vías MAPK. BMP-2 regula la diferenciación osteogénica y condrogénica, la remodelación de la matriz extracelular y la formación de patrones durante el desarrollo, y orienta decisiones de destino celular a través de linajes mesenquimales. La desregulación de la señalización de BMP2 se ha asociado con osificación aberrante, malformaciones esqueléticas y cambios en las señales del microambiente tumoral que influyen en la proliferación, la migración y programas epitelio-mesenquimales. Por ello, BMP2 se estudia ampliamente en biología ósea, modelos de regeneración y análisis de comunicación entre vías que implican la señalización TGF-β/BMP.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO BMP-2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BMP2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BMP2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BMP2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BMP-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BMP2 para la investigación de la señalización de BMP-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de BMP2 críticos para la función de BMP-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BMP2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido BMP-2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BMP-2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BMP2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BMP-2 (h) y el plásmido HDR BMP-2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BMP2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BMP2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.