BMAL2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-435462

Descripción general

Arntl2 codifica BMAL2, un factor de transcripción bHLH-PAS (hélice-bucle-hélice básica PAS) que forma heterodímeros con CLOCK/NPAS2 para regular la expresión génica dependiente de cajas E y coordinar programas transcripcionales circadianos y metabólicos en tejidos de ratón. BMAL2 influye en el circuito central del reloj, en la regulación rítmica de la cromatina y en vías posteriores que incluyen la homeostasis redox, el metabolismo de lípidos y glucosa y la temporización del ciclo celular, mediante el control transcripcional de genes regulados por el reloj. En la literatura, la desregulación de redes asociadas a ARNTL2/BMAL2 se ha vinculado con alteraciones en la señalización inflamatoria, respuestas al estrés y cambios en la migración y diferenciación celular, lo que lo hace relevante para estudios mecanísticos de la disrupción circadiana. Modelos in vivo y celulares implican a BMAL2 en la salida del reloj específica de tejido y en la adaptación a señales ambientales, lo que respalda su uso en investigación sobre neurobiología, metabolismo y estados transcripcionales asociados a tumores, sin que ello implique resultados clínicos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO BMAL2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Arntl2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Arntl2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Arntl2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BMAL2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Arntl2 para la investigación de la señalización de BMAL2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Arntl2 críticos para la función de BMAL2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Arntl2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido BMAL2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido BMAL2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Arntl2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BMAL2 (m) y el plásmido HDR BMAL2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Arntl2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Arntl2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.